نخستین گزارش از شانکر گردو ناشی از Cryptosphaeria pullmanensis در ایران
عنوان دوره: بیست و دومین کنگره گیاهپزشکی ایران
نویسندگان
چکیده
شانکر درختان گردو یکی از بیماری های گردو در نقاط ایران می باشد و تاکنون عوامل مختلفی گزارش گردیده که شناخت ماکروسکوپی آنها غالبا مشکل می باشد و نیاز به جدا سازی و مطالعات ریخت شناختی و در برخی موارد استفاده از ابزار ملکولی است. در طی تابستان 1393 از درختان گردو، شانکری جدید با علائم نقاط دایره ای سیاه بر روی شاخه های مرده در شهرستان های اقلید، بوانات، خان زنیان و مرودشت در استان فارس مشاهده شد. در تحقیق حاضر، 30 جدایه قارچی با استفاده از روش های رایج در بیماری شناسی گیاهی روی محیط کشت عصاره مالت آگار دو درصد (2% MEA) بدست آمد که بر اساس ویژگی های مورفولوژیکی، Cryptosphaeria pullmanensis شناسایی شدند. C. pullmanensis بواسطه بافت استرومایی زرد احاطه شده با یک کنسپتاکل تیره حاوی اطاقک های منظم با دیوارهای مشترک و کنیدیوم ها ی روشن، آلانتوئید و فاقد دیواره عرضی ( متوسط اندازه 72/1 × 42/7 میکرومتر) مشخص شده است. برای تایید خصوصیات ریخت شناختی از روش ملکولی نیز در برخی از جدایه ها استفاده شد. از جفت آغازگرهای ITS1 و ITS4 برای تکثیر ناحیه (Internal Transcribed Spacer) استفاده شد. تمام جدایه ها موفق به تکثیر قطعه 557 جفت بازی شدند. محصول پی سی آر پس از توالی یابی و همردیف سازی چندگانه با استفاده از نرم افزار CLUSTALW با سایر توالی های مربوطه ثبت شده در بانک ژن مقایسه گردید. بلاست جدایه ها حاکی از تشابه 99 درصدی جدایه ما با قارچ C. pullmanensis بود. جهت آزمون بیماریزایی، جدایه ها در محیط کشت PDAو در دمای 25 درجه سلسیوس رشد داده شدند و بعد از گذشت یک هفته جدایه ها بر روی شاخه های گردو در شرایط طبیعی مایه زنی گردیدند. ابتدا سطح پوست شاخه ها با استفاده از اتانول 96 درصد ضدعفونی و سپس بوسیله اسکالپل، شکاف هایی مانند T به طول 15 میلی متر و عرض 5 میلی متر در محل ضدعفونی شده ایجاد گردید. از محیط های کشت قارچ هفت روزه قارچ، به محل زخم مایه زنی گردید. محل مایه زنی، جهت حفظ رطوبت با استفاده از نوار پارافیلم پوشانده شد. در تیمار شاهد از محیط کشت PDA بدون قارچ استفاده شد واصول کخ به اثبات رسید و از بافت های آلوده عامل بیماری جدا سازی و از نظر ریخت شناختی مقایسه گردید. شاخه های مایه زنی شده به محیط کشت بدون قارچ در طول آزمایش بدون علائم بودند. پیشرفت بیماری در طول سال پیمایش گردید. این اولین گزارش از شانکر قارچی گردو ناشی از C. pullmanensis در ایران و گردو میزبان جدیدی برایC. pullmanensis است.
کلیدواژه ها