ردیابی ژن‌های مرتبط با کنترل زیستی در برخی جدایه‌های Pseudomonas و Bacillus

عنوان دوره: بیست و یکمین کنگره گیاه پزشکی ایران
نویسندگان
چکیده
باکتری‌های ‌‌‌متعلق‌‌ به ‌دو جنس Bacillus و Pseudomonas از عوامل مهم بیوکنترل عوامل بیماری‌زای مختلف شناخته شده‌اند. طی تحقیقات صورت گرفته‌ی قبلی، تعداد قابل توجهی از این باکتری‌ها از مزارع و باغ‌های مناطق مختلف استان زنجان جداسازی و اثر آنتاگونیستی آ‌ن‌ها روی بیماری‌های مهم زراعی و باغی این مناطق بررسی شده بود. هدف از تحقیق حاضر شناسائی دقیق باکتری‌های منتخب در سطح گونه و زیرگونه و از سوی دیگر شناسائی ترکیبات بازدارنده‌ی تولید شده توسط این باکتری‌ها است. هفده و سی جدایه به ترتیب متعلق به جنس‌های Bacillus و Pseudomonas، با قدرت بازدارندگی بالا از عوامل بیماری‌زای قارچی و باکتریائی در مناطق مختلف انتخاب و آزمون‌های فیزیولوژیکی و بیوشیمیائی لازم برای شناسائی آن‌ها انجام شد، که نتایج به‌دست آمده با درصد بالائی مشابه خصوصیات ذکر شده برای B. subtilis و P. fluorescens بود. در ادامه، شناسائی جدایه‌ها با پرایمر‌های اختصاصی از جمله Bsub 5F و Bsub 3R برای جدایه‌های B. subtilis انجام شد. نظر به قدرت بالای جدایه‌های سودوموناس در تولید مواد بازدارنده‌ی فرار و غیر ‌فرار در آزمون‌های مختلف، ردیابی ژن‌های دخیل در سنتز و تولید پایولوتئورین، فنازین، پیرولنیترین، سیانید هیدروژن (HCN)، دی استیل فلوروگلوسینول (DAPG) در این جدایه‌ها با استفاده از پرایمر‌های اختصاصی انجام شد. بر‌اساس نتایج، تمامی جدایه‌های باسیلوس مورد مطالعه به B. Subtilis تعلق داشتند و باند اختصاصی bp 595 از DNA همه‌ی این جدایه‌ها تکثیر گردید. علاوه‌ بر این جدایه‌های سودوموناس تماماً به بیووارهای مختلف و عمدتاً بیووار پنج تعلق داشتند. ژن عامل HCN در تعدادی از جدایه‌های سودوموناس ردیابی شد، که با نتایج آزمون تولید آن در آزمایشگاه همخوانی داشت. همچنین تعدادی جدایه‌ها واجد ژن بیوسنتز آنتی بیوتیک فنازین-1-کربوکسیلیک اسید بودند. اما علی‌رغم تولید ترکیبات مختلف بازدارنده توسط جدایه‌های سودوموناس در محیط کشت، ژن سنتز ترکیبات مهمی همچون DAPG، پایولوتئورین و پیرولنیترین در آنها تکثیر نشد.
کلیدواژه ها